产品简介

本产品由高效 DNA 转染试剂及表达增强剂两个组分构成，两者配合可将携带目的基因的质粒转染至真核细胞内并高效表达，并且兼容血清和抗生素，有利于维持细胞的最佳状态。

本产品适用范围：大多数常见哺乳动物细胞系的 DNA 转染，如贴壁细胞（HEK293T、Hela、NIH/3T3、MCF-7、CHO-K1、HepG2、COS-1、COS-7、A549 等），悬浮细胞（CHO-S、Expi293F、HEK293F、HEK293S 等）。

使用说明

• 1. 培养细胞至其汇合度达80%以上；
  注意：
  ①请确认细胞在铺板前处于良好的生长状态；
  ②可用含有抗生素与血清的培养基培养细胞，转染前可无需进行换液操作，推荐前一晚铺板，次日转染。
  

• 2. 制备核酸稀释液：参考表1或表2，使用培养目的细胞所用的同种培养基（不含抗生素和血清，以下简称双无培养基）稀释 DNA 和转染试剂，并用移液器轻轻吹打混匀。
  

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• 3. 制备转染试剂 -DNA 混合物：将稀释后的转染试剂直接加入装有稀释后的 DNA 的离心管中，用移液器吹打混匀，室温静置孵育 10 min；
  4. 将步骤3得到转染试剂 - DNA混合物逐滴加至细胞上清，轻摇混匀；
  5. 将细胞静置培养 12~16 h 后，向转染后的细胞中加入终浓度为 5% 的表达增强剂（以 6 孔板为例，通常每孔含有 2 mL 培养基，则加入 100 μL 表达增强剂），轻摇混匀；
  注意：若所使用的细胞系对表达增强剂敏感，如细胞漂浮或形状改变，可降低表达增强剂的终浓度至3%。
  6. 继续培养 24~36 h，即可用适当方式检测转染效果，如荧光检测、Western Blot、ELISA 或报告基因检测法等。