BCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicin-choninic Acid)法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物，同时将Cu2+还原成Cu+，BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物，其在562nm处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准品溶液，测定范围为20~2,000μg/mL。
试剂A
试剂B
BSA标准品（5mg/mL）
100mL
3mL
1mL
100mL×5
3mL×5
1mL×5
准确性高
变异系数远小于考马斯亮蓝染色法线性范围宽
灵敏，检测范围：20~2,000 μg/mL兼容性好
与金属离子、还原剂、螯合剂及去污剂兼容性较好步骤1: 稀释BSA标准品:
取120μL蛋白标准品(需完全融解)，用与待测蛋白样品相一致的稀释液稀释至300μL，使终浓度为2mg/mL。 注意：为方便起见，也可以用0.9%生理盐水或PBS缓冲液稀释标准品。步骤2: 配置显色工作液:
a. 计算显色工作液总量： 工作液总量 = (BSA标准品样本个数＋待测样本个数)×复孔数×每个样本显色工作液体积 举例：BSA标准品样本个数为9个，待测样本个数3个，复孔数3个。 显色工作液总量 = (9个BSA标准品样本＋3个待测样本)×3个复孔×200μL(每个样本工作液体积) = 7.2 mL b. 根据计算出的所需显色工作液用量，将试剂A和试剂B按照50:1的体积比，配制显色工作液，充分混匀： 注意： ⑴ 由于加样可能存在误差，建议配制BCA工作液时，多配制1~2个孔的量； ⑵ 新配制的BCA工作液室温密封条件下可稳定保存24h。步骤3: 定量检测:
① 将稀释后的标准品按 0，1，2，4，6，8，10，15，20μL分别加到96孔板中，加入用于稀释标准品的溶液补足到20μL(为避免枪尖损失，可先补足稀释液后加入标准品)
1. 本产品可以采用酶标仪(微孔检测法)或者分光光度计(试管检测法)测定蛋白浓度，如使用普通的分光光度计测定，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使其不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少；
2. 试剂在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37℃温育使其溶解；
3. 建议每次测定蛋白样品时，都须绘制标准曲线，以获得准确数据；
4. BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释)；
5. 如待测样品中含较多的干扰物质(具体见附表)，可采用其它蛋白定量产品；
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
7. 本产品仅限科研使用。
总篇数：加载中...
总影响因子：加载中...
最高影响因子：加载中...
上海市闵行区新骏环路760号1号楼3层
400-058-8030
技术支持(电话/微信)：
张老师 18217238522
罗老师 15021027255
李老师 18301721288
如有任何关于雅酶产品问题
欢迎来信咨询
雅酶微信公众号
Copyright © 2023上海雅酶生物医药科技有限公司（Epizyme Biotech）
沪ICP备2021002422号
