本产品是一种单组分即用型溶液,用作ELISA实验的显色底物,其含有TMB,即3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine),是辣根过氧化物酶的常用显色底物之一。
在辣根过氧化物酶的催化作用下,超灵敏TMB显色液会产生可溶性蓝色产物,主要吸收峰在370nm和652nm。加入硫酸或者磷酸终止上述反应后,产物转变为黄色,最大吸收峰为450nm。
实验开始前,请将超灵敏TMB显色液平衡至室温;
完成ELISA显色之前的操作步骤后,在酶标板相应孔中加入100μL超灵敏TMB显色液,用封板胶纸封住反应孔,避光常温或37℃反应3~25min即可;注意:因实验室条件差异,最佳显色时间会有所不同。反应充分时肉眼可见梯度稀释标准品的前3~4孔有明显的梯度蓝色。
加入100μL 2M硫酸至孔中,混匀后即刻使用酶标仪测量OD450,同时设定540nm或570nm作为校正波长,即可计算得到校正吸光度值(OD450-OD540或OD450-OD570)。
注意:读取OD值建议在10min内完成。
1. 在保存和使用时,请勿将TMB接触氧化剂和金属;
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
3. 本产品仅限科研使用。