使用说明

• 步骤1:

  从包装袋中取出预制胶，如下图所示，将胶板底部的粉色胶带撕去；

  
  

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• 步骤2:

  将梳子按箭头方向从胶板中平稳地平行推出；

  
  

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• 步骤3:

  装胶前准备工作，以Bio-Rad或雅酶等品牌电泳设备为例，请按如下步骤操作：
       这类电泳槽的U型密封条顶部有突起结构，而雅酶Super-PAGE^TM系列预制胶该部位是平的，因此电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反向安装，使平滑面朝外，从而防止漏液(如下图所示)。具体操作如下：
  a.将电泳槽中的U型密封条(如图红色部分)拉出，注意这时的密封条两端是有突起的，突起的一面为正面，无突起的为反面;

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• b.将密封条旋转180°(正面朝里，反面朝外)，重新装回电泳装置中，注意把密封条周边压实，防止发生漏液；
  

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• 步骤4:

  按下图所示方法将预制胶安装到电泳装置中;

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• 步骤5:

  向电泳槽的内槽中加入足量的1×Tris/MOPS/SDS电泳缓冲液，浸没点样孔并使液面停留在其上方5mm处，接着在外槽中也加入足量的1×Tris/MOPS/SDS电泳缓冲液，以确保电泳过程中适当的冷却效果;
  注意：
      ①确保外槽电泳缓冲液面低于内槽液面，不可漫过胶板；
      ②Tris-Glycine电泳缓冲液与本产品的Bis-Tris缓冲体系不兼容，请勿使用。
  

• 步骤6:

  使用注射器或其它工具吸取适量1×Tris/MOPS/SDS电泳缓冲液 ，将点样孔轻轻冲洗干净，去除气泡和残留的储存缓冲液。将上样缓冲液处理后的蛋白样品加入点样孔，启动电泳，推荐电压为140~150V，最高不超过180V；

• 步骤7:

  电泳结束后，从胶板中取出凝胶，即可放入成像仪紫外曝光成像，或在紫外切胶台上直接观察。取胶具体操作步骤如下：
  ⑴待电泳结束后，将胶板从电泳槽中取出；
  ⑵用撬具小心插入胶板之间的空隙，按下图所示慢慢撬动胶板上、中、下三个位置，直至胶板两侧完全分开；
  

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• ⑶胶板撬开之后，凝胶可能还会粘在其中一块胶板上，只需将胶板附着凝胶的一侧浸入水中，贴着水面将其倾斜轻轻提起，凝胶即可脱离，将凝胶从水中取出进行后续实验。
  注意：①紫外激发荧光基团需一定时间，一般经1~5min，凝胶上即可呈现清晰的蛋白条带；
             ②观察Western Blot转印后膜上蛋白条带，必须在电泳后，将凝胶经紫外激发出现清晰条带后，再进行转膜操作。若直接转膜再用紫外激发，荧光信号会很弱或无信号。

• 分离图谱(Tris/MOPS/SDS电泳缓冲液，雅酶蛋白分子量标准WJ103，蛋白条带分子量单位：kDa)
  

常见问题

1. 蛋白电泳示踪染料溴酚蓝扭曲、电泳时间大幅度延长：
      ●可能是内槽电泳缓冲液泄漏导致。建议重新夹胶板，防止在电泳过程中内槽液面逐步降低；

2. 电泳时泳道拖尾严重，点样孔样品滞留明显：
      ●可能原因是样品处理不充分：
          a.裂解处理不够充分。建议降低裂解前的样品浓度，或增加裂解液的比例，使样品充分裂解；
          b.上样缓冲液处理不充分。建议对裂解后的样品进行稀释后，再进行上样缓冲液处理；

3. 蛋白条带中间凹陷，两边突起：
      ●可能原因是样品盐离子浓度或表面活性剂浓度过高。建议稀释样品或对样品进行透析后，再进行上样缓冲液处理和上样。