产品概述

本产品是一种预混合的细胞刺激剂，专为细胞因子检测而设计，包含了优化浓度后的佛波酯(Phorbol 12-Myristate 13-Acetate, PMA)和钙离子霉素(Ionomycin)，通过PMA和Ionomycin活化细胞会导致某些标志物(如CD69和CD154)在细胞表面的表达增加。

PMA是一种强效的蛋白激酶C(PKC)激活剂。它通过模仿二酰甘油(DAG)的作用，激活PKC，从而引发细胞内一系列信号传导事件。Ionomycin是一种钙离子载体，能够增加细胞内的钙离子浓度。它通过在细胞膜上形成通道，使钙离子从细胞外或细胞内储存库流入细胞质。PMA和Ionomycin联合使用，可以强效激活T细胞，其能够模拟T细胞受体(TCR)激活的多个信号途径，有效活化细胞，从而诱导产生细胞因子。

操作步骤

1. 将细胞重悬于所需的细胞培养基中。推荐的细胞悬液浓度为 1~2×10⁶cells/mL；

2. 每毫升细胞悬液中加入2μL细胞刺激剂溶液；

3. 将上述细胞放入37°C、5% CO₂细胞培养箱中孵育4~6h；

4. 收集活化的细胞，350×g离心5min，弃上清液；

5. 向细胞沉淀中加入5mL的PBS(货号：CB012)，充分混匀后350×g离心5min，弃上清液；

6. 重复步骤5；

7. 完成实验后，可以用于检测表面标志物或目的蛋白。