末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT)是一种非模板依赖型DNA聚合酶,可以催化在寡核苷酸、单链和双链DNA的3'羟基端添加dNTP,其中寡核苷酸需至少含有3个核苷酸。TdT也可以作用于RNA,其性能严格依赖于受体RNA 3’-末端的三级结构和核苷酸的种类。一般TdT对RNA的作用效率比对DNA低。
37℃,60min内催化1 nmol dNTP添加到多聚核苷酸3'羟基末端所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
寡核苷酸或DNA 3'羟基末端标记;DNA末端加尾(DNA tailing);合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链;5'-RACE等。
70℃加热 10 min 或加入适量 EDTA 均可导致 TdT 失活;
金属离子螯合剂,较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根均对 TdT 有抑制作用。
1. TdT使用时需冰上操作,使用完毕后宜立即置于-20℃保存;
2. 5×Reaction Buffer中含有CoCl2,若其不能与下游应用兼容,需采用过柱离心法或苯酚/氯仿抽提及乙醇沉淀方法纯化反应混合物,除去CoCl2;
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
4. 本产品仅限科研使用。