产品概述

Bradford蛋白浓度测定方法，是常用的经典蛋白浓度检测方法。其原理是考马斯亮蓝G-250与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸结合后，产生蓝色化合物，化合物颜色深浅程度与蛋白浓度在一定范围内有较好的线性关系，因此可通过检测595nm的最大光吸收值来计算蛋白质浓度。

本产品对传统的Bradford方法进行了改良，最佳检测范围为100~500μg/mL，在保留其检测速度快，兼容高浓度还原剂等优点的同时，还能耐受1% SDS、1% NP-40、1% Triton X-100、1% Brij35和1% Tween 20等各种常用去垢剂，从而可以与市面上大多数蛋白裂解液兼容。同时，本试剂盒配备有一系列梯度浓度的蛋白质标准品溶液(BSA溶液)，即取即用，无需稀释，方便快捷。

产品内容

使用说明

• 以微孔酶标仪法为例:
• 1.

  分别取即用型BSA标准品①~⑦各10μL加到96孔板中(BSA标准品使用前须充分溶解摇匀)；
  
  

• 2.

  用1×PBS或0.9%生理盐水将样品适当稀释(可以多作几个梯度，如2倍、4倍、8倍稀释)，加10μL到96孔板的样品孔中；

• 3.

  各孔加入300μL Bradford定量试剂，充分混匀，盖上96孔板盖，室温孵育3~5min；

• 4.

  用酶标仪测定每个样品及BSA标准品的A595，注意要减去空白对照(标准品①＋Bradford定量试剂)的吸光度；

• 5.

  以蛋白标准品的浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线线性公式及R2值，计算样品的蛋白浓度。
  注意：计算样品蛋白浓度时，所测得的浓度值需乘以样品的稀释倍数。