血蓝蛋白(未活化，来源于对虾，KLH替代物)

Native SHC protein

产品简介

      虾血蓝蛋白(SHC)是一种源于对虾的高可溶性血蓝蛋白，可替代钥孔帽贝血蓝蛋白(KLH)，作为载体蛋白与多肽、核酸、药物或毒素等低分子量分子偶联，使其具备高免疫原性。经测试，SHC具有与KLH相当的免疫原性，而其溶解度(尤其是在与半抗原偶联后)则显著高于KLH，从而使免疫原制备方案具有更大的灵活性。
      产品形式：血蓝蛋白以超纯水溶解的冻干形式提供。使用时，可根据需要加入合适的溶液重悬。

使用方法

• SHC活化及半抗原偶联

• SMCC活化：
    1.使用适量超纯水将SHC(未活化)冻干粉复溶为10mg/mL的SHC溶液；
    2.向2mL复溶后的SHC溶液中加入2mL超纯水配制的SMCC溶液(5mg/mL，现配现用)；
    3.室温孵育60min或37℃孵育30min，期间需定时温和混匀；
    4.使用分子筛层析除去过量的SMCC。
  与半抗原偶联:
    1.将20mg含有巯基的半抗原溶解于5mL偶联缓冲液(83mM sodium phosphate, 0.1M EDTA, 0.9M NaCl, 0.1mM TCEP, pH7.2)中；
       注意：0.1 mM TCEP不是必需的，它的主要作用是将半抗原的二硫键还原成巯基。
    2.立即将半抗原溶液与活化后的SHC混合，室温反应2h；
    3.使用分子筛层析除去EDTA。

• EDC活化与半抗原偶联：

• EDC活化：
    1.EDC和NHS在使用前需平衡至室温；
    2.使用适量激活缓冲液(0.1M MES,0.5M NaCl,pH6.0)将SHC(未活化)冻干粉复溶为1mg/mL的SHC溶液；
    3.向1mL上步配制的SHC溶液中加入0.4mg EDC和0.6mg NHS，混匀，室温反应15min；
    4.向反应液中加入1.4μL β-巯基乙醇使EDC失活；
    5.使用分子筛层析除去过量的EDC、NHS和β-巯基乙醇。
  与半抗原偶联:
    1.向活化后的SHC溶液中加入等摩尔量的半抗原(溶解于PBS中)，室温反应2h；
    2.向上步反应液中加入终浓度为10mM的羟胺(hydroxylamine)终止反应；
    3.使用分子筛层析除去过量的羟胺。