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转膜与封闭

免冰浴快速转膜缓冲液速溶颗粒(湿转法)

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产品简介

本产品为白色或淡黄色速溶颗粒,每袋可配制1L 1×免冰浴快速转膜缓冲液,15~40min即可完成Western Blot湿转法转膜。配制过程中,可用无水乙醇替代甲醇,转膜全程产热量小,无需冰浴。

操作步骤

1. 将大约600mL蒸馏水倒入烧杯,并向其中缓慢加入1袋免冰浴快速转膜缓冲液速溶颗粒,搅拌溶液直至颗粒完全溶解;

2. 向步骤1所得溶液中加入蒸馏水,定容至900mL;

3. 向步骤2所得溶液中加入 100mL无水乙醇或甲醇,混匀即为1×湿转法免冰浴快速转膜缓冲液。

转膜条件参考

1. 梯度胶,浓度4%~15%,厚度1.5mm,三色预染分子量标准WJ103(10~250 kDa),恒流400mA,30min,所有条带即可完成转膜;

2. 普通PAGE胶,转膜效率与胶浓度有关,对于各浓度1.0mm凝胶,采用恒流400mA,按如下时长即可将150kDa以下蛋白转印完全,若蛋白分子量大于150kDa,需延长转膜时间5~10min:

tf105.png

3. PAGE胶厚度越大,转膜效率越低,对于厚度1.5mm的凝胶,可将条目2中转膜时间相应延长5~10min。

注意事项

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

2. 本产品仅限科研使用。

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