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体外转录

无机焦磷酸酶(0.1U/µL)

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产品概述

在16℃~37℃下,无机焦磷酸酶可催化无机焦磷酸盐水解为两个正磷酸盐,主要用于降解核酸合成反应体系中的副产物焦磷酸,从而解除其对核酸合成反应的抑制作用,提高合成产量。

本产品来源于酵母,是通过大肠杆菌重组表达所得的大小为37kDa的蛋白酶,反应过程需要Mg2+,可应用于RNA体外转录、DNA复制和扩增(如HDA或LAMP等温扩增)等实验。

货号规格 
FEN103S 10U
FEN103 100U
单位定义
标准反应条件下,每分钟催化水解1μmol焦磷酸根(PPi),所需要的酶量定义为1个活性单位。酶活性在以下混合物中测定:100mM Tris-HCl (pH 7.2),2mM MgCl2和1mM无机焦磷酸盐(PPi)。

工作原理

fen103.png

验证实例

无机焦磷酸酶在体外转录实验中的应用。
在标准体外转录反应体系中,分别加入0、0.025、0.05和0.1U无机焦磷酸酶,反应结束后通过核酸凝胶电泳检测转录产物,对比无焦磷酸酶的转录体系,焦磷酸酶对体外转录反应RNA产率的提高有促进作用,向标准体外转录体系中加入0.05U无机焦磷酸酶最合适。

fen1031.png

注意事项

1. 本产品在多种反应缓冲体系中均具有活性,在HDA扩增以及LAMP扩增等实验中通常可直接接入;

2. 本产品最适反应温度为25℃,其在16~37℃均有活性,65℃ 10min可使其失活;

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

4. 本产品仅限科研使用。

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