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核酸电泳

EpiGreen安全核酸染料(10,000×)

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产品概述

本产品是一款高效稳定的核酸荧光染料,因其具有较大的分子量(约1,200),故无法穿透细胞膜,安全无毒。EpiGreen安全核酸染料的灵敏度高于澳化乙锭(EB),与TAE、TBE等常用电泳缓冲液兼容,可用于各种片段大小的核酸电泳染色,其最大激发波长约在500nm处,而在250~300nm处的激发光较弱,因此优先推荐使用配置蓝光光源的凝胶成像仪进行成像,其次才是紫外光源。

操作步骤

核酸与大分子安全染料相结合可能会影响其迁移率,因此优先推荐使用泡染法。
泡染法(推荐)
1.按照常规方法进行电泳。
2.配制3×EpiGreen染色液并进行染胶操作,步骤如下:
①将EpiGreen安全核酸染料(10,000×)稀释约3,300倍至0.1mol/L NaCl中;
例如:可将15μL EpiGreen安全核酸染料(10,000×)和5mL 1mol/L NaCl加入45mL H2O中。
注意:一次可配制大量3×EpiGreen染色液,常温避光保存直至用完即可。
②将电泳后的凝胶小心置于合适的容器中,缓慢加入足量的3×EpiGreen染色液浸没凝胶,室温振荡染色30~60min,染色时间可根据凝胶厚度及琼脂糖浓度的增加而适当延长。
胶染法
1.制胶时,将EpiGreen安全核酸染料(10,000×)按1:10,000加入琼脂糖溶液中;
例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL EpiGreen安全核酸染料(10,000×)即可。
注意:EpiGreen安全核酸染料(10,000×)具有良好的热稳定性,可以将其直接添加入热的琼脂糖溶液中。或者也可将EpiGreen安全核酸染料(10,000×)加入琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,再用微波炉或其它方式加热制备琼脂糖凝胶。
2.按照常规方法进行电泳。
注意:①建议使用较低电压进行电泳,并适当延长电泳时间;
           ②减少核酸上样量(2~30ng即可),以免条带弥散或弯曲;
           ③适当降低凝胶浓度,提高大片段的分辨率。

注意事项

1. 本产品在低温下易产生沉淀可45~50℃加热2min,涡旋振荡混匀即可除去沉淀;

2. 采用泡染法染色3×EpiGreen染色液约可重复使用3次;

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

4. 本产品仅限科研使用。

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