Omni-PAGETM预制胶(Hepes-Tris)是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶,常用于PAGE和Western Blot检测。本预制胶含有1.5cm高度的4%浓缩胶。丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29:1,凝胶厚度为1.5mm,加样孔数为10孔/15孔,最大上样量为60 μL/30μL,胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1mm;凝胶尺寸为:宽×高×厚度为81×74×1.5mm。
稳定性高
采用自动化灌胶生产技术,确保了产品质量的高稳定性和重复性条带清晰
采用玻璃胶板,有效减少蛋白非特异性吸附,使蛋白条带更为尖锐,清晰操作简便
胶夹打开极为轻松,只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下即可打开通用性强
凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳(需使用非变性电泳液)兼容性强
兼容市场上主流的mini电泳槽,如雅酶,Bio-Rad,Invitrogen,天能和君意东方等种类多样
提供多种浓度的均一胶和梯度胶。均一胶可选浓度:8%,10%,12%,15%。梯度胶可选浓度:4~15%,4~20%,8~20%使用Bio-Rad电泳槽请按如下操作:
Bio-Rad Mini-PROTEAN系列电泳槽的U型密封条顶部有突起结构,而雅酶Omni-PAGETM系列预制胶因其短玻板是凹形结构,该部位是平的,因此电泳前需将具有突起结构的密封条取出后反向安装,使平滑面朝外,从而防止漏液(如下图所示)。具体操作如下:
a.将Bio-Rad电泳槽中的U型密封条(如图绿色部分)拉出,注意这时的密封条两端是有突起的,突起的一面为正面,无突起的为反面;
b.将密封条旋转180°(正面朝里,反面朝外),重新装回电泳槽中,注意把密封圈周边压实,防止发生漏液;
c.放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。
使用Life Technology Novex电泳槽请按如下操作:
由于雅酶Omni-PAGETM系列预制胶比Invitrogen NuPAGE预制胶略薄,所以需要特制的挡板,使得该系列预制胶能够适用于Life Technology Novex电泳槽。如有需要,请在订购本产品时告知,雅酶会免费赠送该特制挡板。
分离图谱(蛋白条带分子量单位:kDa)
1.
蛋白电泳示踪染料溴酚蓝扭曲、电泳时间大幅度延长:
●可能是内槽缓冲液泄漏导致。建议重新夹胶板,防止在电泳过程中内槽液面逐步降低;
2.
使用自己配制的其它体系电泳缓冲液电泳后条带较模糊:
●本预制胶为中性,对电泳缓冲液的要求比传统pH8.8的分离胶要高,缓冲液配制不当,或长期放置变质,都会对本预制胶的蛋白电泳效果产生影响;
3. 电压为150V电泳时,一块胶的电流在80mA左右,2块胶的电流在140mA左右,随着时间增加电流会逐步降低。如果电流明显不在这一范围,需检查电泳液的质量,电极是否插反及内槽电泳液是否有漏液现象;
4. 湿转时,需120V恒压转膜60~90min。为达到更好的转膜效果,可以根据预制胶上残留的或膜上的预染蛋白分子量标准确定转膜效率,并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量,凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。大蛋白尽量选择低浓度的胶。蛋白分子量100kDa以上,建议甲醇浓度5%;10~100kDa,建议甲醇浓度10%;10kDa以下,建议甲醇浓度20%~30%;
5.
电泳时泳道拖尾严重,点样孔样品滞留明显:
●可能原因是样品处理不充分:
a.裂解处理不够充分。建议降低裂解前的样品浓度,或增加裂解液的比例,使样品充分裂解;
b.上样缓冲液处理不充分。建议对裂解后的样品进行稀释后,再进行上样缓冲液处理;
6.
蛋白条带中间凹陷,两边突起:
●可能原因是样品盐离子浓度或表面活性剂浓度过高。建议稀释样品或对样品进行透析后,再进行上样缓冲液处理和上样。
1. Omni-PAGETM预制胶(Hepes-Tris)使用的是中性的Hepes缓冲系统,请勿使用Tris-Glycine等其它电泳缓冲液进行电泳;
2. 如果需要蛋白条带更加清晰、平直,可降低电压至100~120V,适当延长电泳时间;
3. 电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后,缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化,不能确保电泳效果;
4. 电泳结束后可以使用Tris-Glycine转膜液进行转膜。将凝胶浸泡在转膜液中10~15min, 使凝胶中的缓冲液得到充分平衡,再进行转膜;
5. 上样时移液器吸头不要过度插入点样孔,以免戳破凝胶造成漏液;
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
7. 本产品仅限科研使用。
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